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DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細(xì)胞的基礎(chǔ)上,多次苯酚氯仿等有機(jī)溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機(jī)相,而核酸保留在水相,達(dá)到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機(jī)溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應(yīng),zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復(fù)合物,此復(fù)合物在高鹽（0.7mol/...

體外培養(yǎng)的細(xì)胞受到嚴(yán)重污染時，有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此，防止污染，預(yù)防是關(guān)鍵。只有將預(yù)防措施貫穿于整個細(xì)胞培養(yǎng)的始終，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：1、從物品、用品消毒滅菌著手細(xì)胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細(xì)，并在取樣檢菌一周后確認(rèn)無菌才能使用。同時，在無菌過濾操作中，隨著濾過體積的增大，濾膜破損的可能性增加，故應(yīng)選擇zui后過濾的液體進(jìn)行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行消毒。具體操作：75%的酒精搽拭培養(yǎng)...

固相萃取柱用于HPLC，GC，LC-MS/MS，GC-MS或其他技術(shù)分析樣品的制備。廣泛應(yīng)用在藥物代謝及動力學(xué)、藥物分析、生物檢測、毒品和興奮劑檢測、食品安全分析、環(huán)境分析等領(lǐng)域。固相萃取柱應(yīng)用的科學(xué)原理很簡單：一是讓待檢測的化合物通過固相萃取柱，而讓雜質(zhì)保留在固相萃取柱上，應(yīng)用廣泛的實例包括C18，PSA，NH2固相萃取柱于農(nóng)殘分析；另一種策略就是讓雜質(zhì)穿過固相萃取柱，固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測的化合物。固相萃取就是一種“開、關(guān)”原理，待檢測化合物要么*保留再洗脫...

熒光定量PCR因操作方便、運行速度快、實驗結(jié)果準(zhǔn)確，受到越來越多的分子生物學(xué)研究者青睞。在實驗技術(shù)成熟的今天，也許對你來說，zui難得不是實驗技術(shù)上的問題——而是選擇哪一種熒光定量PCR儀——你要征詢實驗室成員的意見、分析實驗室目前乃至將來的需求、平衡實驗室的預(yù)算，更要詳細(xì)研究各種極富誘惑力的宣傳資料。面對各種不同性能的產(chǎn)品，您又該如何選擇呢？認(rèn)識熒光定量PCR的兩個誤區(qū)：誤區(qū)一：儀器通道越多越好隨著PCR技術(shù)的成熟運用，多重擴(kuò)增越來越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。從zu...

原理：抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng)，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇（Antigenicdeterminant），另一方面取決于機(jī)體的免疫狀態(tài)，當(dāng)具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)。抗原的種類繁多，包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特...

經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長時間生長繁殖的合成培養(yǎng)基。但是它們可能包含個別蛋白或大量蛋白組分。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求，但對有些實驗卻不適合，如觀察一種生長因子對某種細(xì)胞的作用，這時需要排除其他生長因子的干擾作用。而血清中可能含有各種生長因子；又如需要...